dc.identifier.uri |
http://dx.doi.org/10.15488/8610 |
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dc.identifier.uri |
https://www.repo.uni-hannover.de/handle/123456789/8663 |
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dc.contributor.author |
Geise, Hendrik
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ger |
dc.date.accessioned |
2019-12-09T08:17:03Z |
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dc.date.available |
2019-12-09T08:17:03Z |
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dc.date.issued |
2019 |
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dc.identifier.citation |
Geise, Hendrik: Studien zur Assemblierung der Tat-Translokase von Escherichia coli. Hannover : Gottfried Wilhelm Leibniz Universität, Diss., 2019, XI, 182 S. DOI: https://doi.org/10.15488/8610 |
ger |
dc.description.abstract |
Das twin-arginine-translocation (Tat)-System transportiert gefaltete Proteine über prokary-otische, plastidäre und einige mitochondriale Membranen. Das Tat-System von Escherichia coli besteht aus den Komponenten TatA/E, TatB und TatC. Diese assemblieren im Laufe des Transportes zu Tat-Komplexen mit unterschiedlichen Molekulargewichten, welche mit zu transportierenden Substraten interagieren können. TatB und TatC stellen zentrale Bestandteile aller bisher beobachteten Tat-Komplexe dar. Jedoch ist weder die Rolle von TatA/E bei der Assemblierung von Tat-Komplexen, noch die Stöchiometrie der einzelnen Komponenten in-nerhalb dieser Komplexe bekannt. Ebenso ist der Mechanismus des Tat-abhängigen Protein-transports ungeklärt.
Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurden die Einflüsse der Tat-Komponenten und Tat-Substrate auf die bekannten Tat-Komplexe sowie auf einen bisher nicht charakterisierten Tat-Komplex untersucht. Hierfür wurden die assemblierten Tat-Komplexe in An- und Abwesenheit einzelner oder mehrerer Komponenten des Tat-Systems mittels BN-PAGE/Western-Blot analysiert. Für die Untersuchung des Einflusses von Tat-Substraten wurde die Substrataffinität der Tat-Komplexe anhand spezieller Aminosäureaustausche modifiziert. Hierbei zeigte sich, dass die Tat-Komponenten TatA/E, TatB und TatC essenziell für die Assemblierung funktionaler Tat-Komplexe sind. Außerdem handelt es sich bei dem zuvor nicht charakterisierten Tat-Komplex um einen TatABC-Komplex. Dieser liegt, in Anwesenheit von TatA, nicht in Assoziation mit Substraten vor. Die TatA-Abhängigkeit sowie die Dissoziation von assoziierten Substraten weisen darauf hin, dass es sich bei dem Tat-Komplex um ein spätes Intermediat des Tat-Translokons handeln könnte.
Neben der Charakterisierung und Untersuchung von Tat-Komplexen wurden im Rahmen der vorliegenden Arbeit ebenfalls Strategien für die Reinigung von Tat-Komplexen etabliert. Hierbei gelang es, die bisher bekannten TatABC-Komplexe anzureichern. Es konnten weiterhin Rückschlüsse auf die Stabilität verschiedener Tat-Komplexe gezogen werden. So zeigte sich, dass stabilisierende Agenzien wie Saccharose für die Anreicherung vom Tat-Komplex 2 benötigt werden, während Tat-Komplex 1 auch ohne den Zusatz von Saccharose angereichert werden konnte. |
ger |
dc.language.iso |
ger |
ger |
dc.publisher |
Hannover : Institutionelles Repositorium der Leibniz Universität Hannover |
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dc.rights |
CC BY 3.0 DE |
ger |
dc.rights.uri |
http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/de/ |
ger |
dc.subject |
membrane protein complexes |
eng |
dc.subject |
twin-arginine-translocation |
eng |
dc.subject |
Escherichia coli |
ger |
dc.subject |
Membranproteinkomplexe |
ger |
dc.subject.ddc |
570 | Biowissenschaften, Biologie
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ger |
dc.title |
Studien zur Assemblierung der Tat-Translokase von Escherichia coli |
ger |
dc.type |
DoctoralThesis |
ger |
dc.type |
Text |
ger |
dcterms.extent |
XI, 182 S. |
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dc.description.version |
publishedVersion |
ger |
tib.accessRights |
frei zug�nglich |
ger |