Entwicklung eines Aptamer-basierten Lateral Flow Assays zur Detektion eines veterinärdiagnostischen Targets

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Schüling, Torsten: Entwicklung eines Aptamer-basierten Lateral Flow Assays zur Detektion eines veterinärdiagnostischen Targets. Hannover : Gottfried Wilhelm Leibniz Universität, Diss., 2021, viii, 120 S. DOI: https://doi.org/10.15488/11515

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Abstract: 
Lateral Flow Assays ermöglichen eine Detektion chemischer Verbindungenauf einfache Art und Weise. Momentan sind z.B. Antigentests zur Detektioneiner SARS-CoV-2 Infektion stark nachgefragt. Im Rahmen dieser Dissertationwurde das β-Lactam-Antibiotikum Ampicillin als vielversprechenderAnalyt für die Entwicklung eines solchen Schnelltests ausgesucht, daAmpicillin intensiv in der Landwirtschaft eingesetzt wird. Dabei könnenRückstände auch in der Kuhmilch nachgewiesen werden, weshalb in der EUf ür viele Antibiotika Grenzwerte festgelegt wurden.Für die molekulare Erkennung von Ampicillin wurden in dieser ArbeitAptamere genutzt. Mit Hilfe der Microscale Thermophoresis konnte dieAffinität des Aptamers zu Ampicillin bestimmt werden. Für kleineMolek¨ ule wie Ampicillin ist ein kompetitives Assayformat vorteilhaft,weshalb drei Oligonukleotide charakterisiert und in MicroarrayExperimenten auf ihre Eignung zur Detektion von Ampicillin überprüftwurden. Zur Üersetzung der Aptamerbindung in ein kolorimetrischesSignal wurden Goldnanopartikel verwendet. Nach der Synthese derPartikel fand eine Immobilisierung der Aptamere auf der Partikeloberflächestatt. Neben Elektronenmikroskop Aufnahmen wurden vor allem dieUV-Vis-Spektroskopie und die dynamische Lichtstreuung zur Analyseeingesetzt. Zuletzt fand eine Übertragung der Ergebnisse auf das LateralFlow Assay Format statt.
License of this version: CC BY 3.0 DE
Document Type: DoctoralThesis
Publishing status: publishedVersion
Issue Date: 2021-06-28
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