Detection of histone modifications in plant leaves

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Jaskiewicz, M.; Peterhansel, C.; Conrath, U.: Detection of histone modifications in plant leaves. In: Journal of Visualized Experiments (2011), Nr. 55, e3096. DOI: https://doi.org/10.3791/3096

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Kleine Vorschau
Zusammenfassung: 
Chromatin structure is important for the regulation of gene expression in eukaryotes. In this process, chromatin remodeling, DNA methylation, and covalent modifications on the amino-terminal tails of histones H3 and H4 play essential roles. H3 and H4 histone modifications include methylation of lysine and arginine, acetylation of lysine, and phosphorylation of serine residues. These modifications are associated either with gene activation, repression, or a primed state of gene that supports more rapid and robust activation of expression after perception of appropriate signals (microbe-associated molecular patterns, light, hormones, etc.)3-7. Here, we present a method for the reliable and sensitive detection of specific chromatin modifications on selected plant genes. The technique is based on the crosslinking of (modified) histones and DNA with formaldehyde, extraction and sonication of chromatin, chromatin immunoprecipitation (ChIP) with modification-specific antibodies, de-crosslinking of histone-DNA complexes, and gene-specific real-time quantitative PCR. The approach has proven useful for detecting specific histone modifications associated with C4 photosynthesis in maize and systemic immunity in Arabidopsis.
Lizenzbestimmungen: CC BY-NC-ND 3.0 Unported
Publikationstyp: Article
Publikationsstatus: publishedVersion
Erstveröffentlichung: 2011
Die Publikation erscheint in Sammlung(en):Naturwissenschaftliche Fakultät

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